Edman降解测序:一种可靠的N端蛋白分析方法
引言:精准识别N端序列,为蛋白研究打下基础 在蛋白质研究中,氨基酸序列的精确鉴定是理解其功能与结构的第一步。虽然现代质谱技术已在蛋白质组学领域大放异彩,但在某些特定场景下,一种经典的序列分析方法依然不可或缺——Edman降解(Edman degradation)。这种以化学方
用Edman降解解决抗体开发中的N末端阻断挑战
在抗体药物的研发过程中,蛋白质序列的准确解析是确保药物功能与安全性的核心环节。然而,抗体分子N末端的化学修饰或结构异常(即“N末端阻断”)常导致传统测序技术失效,这一问题已成为抗体开发领域长期存在的技术瓶颈。Edman降解作为一种经典的N端测序方法,凭借其独特的化学特性,在应
液相色谱-质谱联用技术在定量蛋白质组学中的应用
蛋白质组学作为生命科学领域的重要分支,致力于全面解析细胞、组织或机体中蛋白质的表达、修饰与相互作用。定量蛋白质组学则进一步推动了生物医学、药物开发及疾病机制研究的发展。其中,液相色谱-质谱联用技术(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS/MS)因
SILAC标记法在定量蛋白质组学中的应用与挑战
在定量蛋白质组学(Quantitative Proteomics)领域,准确、可重复地测量不同样本间蛋白质丰度变化,是揭示生物学机制的关键。稳定同位素标记氨基酸细胞培养(SILAC, Stable Isotope Labeling by Amino acids in Cell culture)作为一
无标记定量技术(LFQ):原理、应用与最新进展
引言:为何越来越多科研人员选择LFQ? 在蛋白组学研究中,“定量”不仅是对蛋白存在与否的判断,更是对其在不同生理或病理状态下表达变化的精准刻画。传统的同位素标记方法如TMT、iTRAQ虽然灵敏度高,但成本较高、流程复杂。无标记定量技术(Label-Free Quantific
翻译后修饰如何影响蛋白质生物学功能?
蛋白质是细胞执行各种生命活动的核心分子。然而,蛋白质在合成完成后并不立刻“投入使用”,它们往往还需经历一系列精细调控的翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)。这些修饰对蛋白质的结构、功能乃至其在细胞中的命运具有深远影响。本文
单细胞蛋白质组学分析:方法与关键技术
在现代生命科学研究中,理解细胞间的异质性对于解析疾病机制、开发精准治疗和重建组织发育图谱具有重要意义。单细胞RNA测序已在转录水平提供了丰富信息,但蛋白质作为直接执行功能的分子,更能真实反映细胞状态。因此,单细胞蛋白质组学(Single-Cell Proteomics, SCP)逐步成为探索细胞命运
如何克服无标记蛋白质组学的重现性问题?
无标记蛋白质组学(Label-Free Quantitative Proteomics)因其样本通量高、操作流程相对简洁、无需昂贵试剂而被广泛应用于疾病机制研究、生物标志物发现和药物作用靶点筛选。然而,随着大规模项目的不断推进,研究者也逐渐意识到——重现性差是制约无标记定量深
DIA 技术在蛋白质定量中的优势与局限
蛋白质组学的研究深度与广度不断拓展,在多样本、多条件和复杂表型的研究中,数据的稳定性、覆盖度和重现性成为蛋白质定量分析的核心关注点。数据依赖采集(Data-Dependent Acquisition, DDA)技术虽然已被广泛应用于蛋白质组学研究,但随着研究复杂性的提升,DDA逐渐暴露出检测偏倚、低
单细胞蛋白质组学如何加速精准医学发展?
精准医学致力于根据患者的个体特征制定更科学的诊疗策略,其本质依赖于对疾病机制的深入理解和对治疗响应的动态监测。在组学技术推动下,基因测序、转录组分析和单细胞RNA测序等手段为精准医学构建了基础框架。然而,精准医学不只是“看基因”,还需“读功能”。蛋白质